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产品目录

线粒体呼吸链复合物III试剂盒(辅酶Q-细胞色素C还原酶)图片
产品货号:
SNM100
中文名称:
线粒体呼吸链复合物III试剂盒(辅酶Q-细胞色素C还原酶)
英文名称:
Electron transport chain Complex III assay kit
产品规格:
20管/10样
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
检测指标:线粒体呼吸链复合物III
线粒体呼吸链复合物III(辅酶Q-细胞色素C 还原酶)活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用还原性合成辅酶Q 同功类似物和特异性抑制剂,通过反应系统测定样品中细胞色素C 还原后峰值的增高,即采用比色法测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种纯化线粒体样品(动物、人体、酵母)以及细胞或组织裂解悬液样品的辅酶Q-细胞色素C 还原酶的特异性活性检测。可用于衰老、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶,严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,反应优化,检测敏感。

线粒体呼吸链复合物III,通常称为辅酶Q-细胞色素C还原酶、细胞色素还原酶或bc1复合物(ubiquinolcytochrome c oxidoreductase;cytochrome reductase;bc1 complex),是线粒体电子传递链的中心元素:含有十一个亚单位,包括细胞色素b(Cytochrome b),细胞色素c1(cytochrome c1)和Rieske铁硫蛋白(Rieskeiron-sulfur protein),通过Q循环(Q cycle)进行催化作用。其特征性的酶活性是抗霉素敏感的辅酶Q-细胞色素C还原酶。复合物III催化氧化型细胞色素C被还原为还原型细胞色素C,线粒体内电子由供体还原型泛醌(ubiquinol;UQH2)或还原型辅酶Q(reduced Coenzyme Q;CoQH2)传递到细胞色素C上的能量转移反应,进行呼吸链传递。该酶异常会导致心肌疾病。辅酶Q-细胞色素C还原酶反应系统测定氧化型细胞色素C的浓度变化。基于还原型泛醌或还原型辅酶Q底物,在抗霉素存在与否的情况下,通过辅酶Q-细胞色素C还原酶的催化,转化成泛醌(ubiquinone;UQ)或辅酶Q(Coenzyme Q;CoQ),同时氧化型细胞色素C,转化为还原型细胞色素C,在分光光度仪下产生吸光峰值的变化(550nm 波长),由此定量测定辅酶Q-细胞色素C还原酶的特异活性。

试剂盒组份:
缓冲液(Reagent A) 20 毫升
反应液A(Reagent B) 125 微升
反应液B(Reagent C) 125 微升
阴性液(Reagent D) 2 毫升
底物液(Reagent E) 500 微升
专性液(Reagent F) 200 微升

保存方式
-20℃冰箱避光保存,避免反复冻融;反应液B(Reagent C)和底物液(Reagent E),有效期3个月

注意事项
1. 本产品为21 次操作(10 个样本),包括1 次背景对照测定。
2. 操作时,须戴手套。
3. 系统操作过程中,背景测定只需1次。
4. 线粒体样品检测前,须溶解;建议冻存融解(-70℃至37℃)循环3次。
5. 如果增强酶活检测,建议使用线粒体复合物待测样品预处理试剂盒。
6. 加入样品启动反应后3 秒内即刻比色测定。
7. 分光光度计波长严格设置在550nm,误差10nm 将不产生信号。
8. 通常反应1 分钟后比色测定值趋于稳定;测定值由低到高变化;测定可以持续5分钟。
9. 测定值由低到高变化,即5 分钟测定读数高于0 分钟测定读数,表明有酶活性。
10.比色测定后,比色皿须清洗彻底。
11.建议待测样本线粒体蛋白浓度为10 微克/100 微升;如果样本酶活性过低或过高,则可以增加或降低样本量;注意计算公式的调整(本企业提供线粒体溶解试剂盒为后续的线粒体蛋白浓度测定的预处理试剂盒和 Bradford 蛋白质浓度定量试剂盒)。
12.如果使用细胞或组织裂解悬液,则蛋白浓度为50 微克/100 微升。
13.样品特异活性是指抗霉素敏感的辅酶Q-细胞色素C 还原酶,去除其它干扰因素(例如复合物I/II/IV等)。
14.线粒体呼吸链复合物III(辅酶Q-细胞色素C 还原酶)单位活性定义为:在30℃,pH 7.5 条件下,每分钟内能够氧化1 微摩尔还原型泛醌(CoQH2)所需的酶量作为一个活性单位。
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