网站旧版  |  加入收藏
金沙贵宾会官方0029客服电话金沙贵宾会2999comQQ金沙贵宾会2999comQQ金沙贵宾会2999comQQ
金沙贵宾会官方0029微信服务号

产品目录

血液样本直接PCR试剂盒图片
产品货号:
WH0007
中文名称:
血液样本直接PCR试剂盒
英文名称:
Blood direct PCR kit
产品规格:
100次|500次
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒利用基因工程改造的抗抑制性DNA聚合酶,能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。配合精心优化的Buffer体系,具有超强抗PCR抑制物能力,可直接以血液/培养细胞为模板进行PCR扩增,操作简便,无需进行DNA的纯化或样品前处理等繁琐步骤。试剂盒的PCR组分为2×预混Mix,只需加入血液模板和相应检测引物即可进行反应,适于人、小鼠、猪、牛等哺乳动物和禽类等物种的培养细胞,新鲜及4℃储存冷冻全血、抗凝血(EDTA、柠檬盐、肝素)、液化的血凝块及贮存在Whatman903和FTA?Elute商用卡上的干血斑等样本PCR检测。PCR产物3'端为A,可直接用于TA载体克隆。可用于基因组DNA片段的扩增检测、高通量遗传分析和基因分型(如基因缺失)等研究。

产品特点:
·简便快捷:直接以血液为模板进行PCR鉴定,告别样本前处理和DNA提取等繁琐步骤;
·纯度高:不需前处理和DNA提取过程,避免样本交叉污染问题;
·通量高:配合96/384孔PCR板使用,可进行大规模样本的PCR鉴定工作;
·普适性强:有效扩增高GC或具有复杂二级结构的片段,扩增长度可达5 kb;
·抗逆性强:适用于多物种、多种不同保存方式的血液样品。

扩增实例:
血液样本直接PCR试剂盒实例1
以人类EDTA抗凝血为模板,用本试剂盒对4个GC含量不同的基因进行扩增,PCR反应体系为20μl,血液加样量为1μl。
1:片段长度1090bp,GC含量68.1%;
2:片段长度1915bp,GC含量70.4%;
3:片段长度448bp,GC含量74.8%;
4:片段长度1527bp,GC含量61.5%;
实验结果:本试剂盒可高效扩增GC含量为61.5~74.8之间的基因片段,具有扩增高GC片段的能力。


血液样本直接PCR试剂盒实例2
长片段扩增:扩增片段长度可达4 kb。
以人类EDTA抗凝血为模板,用本试剂盒对ActB,Prp,DN1.0,Hn2.0和Hn4.0等5个长度不同的基因进行扩增,PCR反应体系为20μl,1μl血液为模板。
实验结果:本试剂盒扩增片段长度可达4kb,具有较强的长片段扩增能力。


血液样本直接PCR试剂盒实例3
抗逆性强:血液模板加入范围可达0.1~5μl。
以人类EDTA抗凝血为模板,用本试剂盒进行不同血液加样量的PCR检测,PCR反应体系为20μl,产物长度为750bp。
实验结果:本试剂盒对血液有很强的抗逆性,可覆盖0.1~5μl的血液模板范围。


血液样本直接PCR试剂盒实例4
样品适用广泛:适用于多种保存形式的样本。
以人类、大鼠、鸡等物种不同处理方式的血液样品为模板,用本试剂盒分别对PRNP(人,750bp),Actin(大鼠,200bp)和β-Actin(鸡,1kb)等基因进行扩增,PCR反应体系为20μl,血液模板样本量为1μl。
实验结果:本试剂盒具有广泛的样品适用性,可以对不同物种的不同处理方式的血液样品进行直接PCR检测。

试剂盒组成:
组分100T500T
2×Blood Direct PCR MasterMix1ml5×1ml
RNase-Free ddH2O1ml5×1ml

保存条件:-20℃条件下可保存12个月;从-20℃取出使用时,将冻存的2×BloodDirect PCR MasterMix融解,然后轻轻颠倒混匀,待溶液完全均一后再行使用。如需一段时间内经常取用,可在2-8℃条件下储存3个月,但要避免反复多次冻融。

注意事项:(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1.过多的血液模板会抑制PCR扩增反应,请参考“血液模板的建议用量”来调整模板用量。在20μl反应体系中,最适的模板加入量为1-2 μl。初次实验时,建议在1-5 μl范围内设置梯度模板加入量,以便找到最适模板用量。
2.若使用其他不同的反应体积请等比例减少或增加模板使用量。
3.扩增产物由于血液模板中血红蛋白的变性而呈现浑浊现象,这不影响后续的电泳检测,但如果后续进行克隆、测序等实验则需对产物进行纯化。

使用方法:
注意:以下举例仅供参考,实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据实际情况,设定最佳反应条件。

1.使用血液直接PCR试剂盒,以人类EDTA抗凝血为模板,扩增1 kb的片段。
2.按照下表中各组分的加入量进行反应液的配制。
??反应体系:
组分50μl体系20μl体系终浓度
血液样品模板2.5 μl1 μl-
正向引物(10μM)1.25μl0.5μl250 nM
反向引物(10μM)1.25μl0.5μl250 nM
2 × Blood Direct PCR MasterMix25μl10μl
RNase-Free ddH2O至50μl至20μl-


??血液模板用量建议(以20μl反应体系为例):
模板种类处理方法用量范围最佳用量
人类抗凝血无需处理0.1-5 μl1μl
鼠类抗凝血无需处理0.1-5 μl1μl
禽类抗凝血无需处理0.1-5 μl1μl
人类血凝块进行液化处理
(目录号WH9001)
0.1-5 μl1μl
干血斑利用打孔器打下干血斑1-2片直径
3mm的干血斑
1片直径
3mm的干血斑
培养细胞离心除去培养基,
用适量TE悬浮细胞,
以细胞悬液为模板
1-103100个


3.按照下表设置PCR反应程序。
??反应程序:
阶段循环数温度时间内容
预变性195℃3~5min预变性
PCR反应35~4094℃15 sec变性
60℃20 sec退火
72℃1 min延伸
补充延伸172℃5min补充延伸

4.结果检测:反应结束后取10 μl反应产物,进行琼脂糖凝胶电泳检测。
金沙贵宾会官方0029 |  关于咱们 |  联系咱们 |  在线咨询 |  网站地图
2013-2018 金沙贵宾会002999 京ICP备14007103号
XML 地图 | Sitemap 地图
Baidu
sogou