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产品目录

半乳糖自诱导培养基图片
产品货号:
BTN100825
中文名称:
半乳糖自诱导培养基
英文名称:
Galactose Auto-induction Medium
产品规格:
200mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本产品是在pET专用生长培养基的基础上开发而成的,它利用E.coli自身对培养基中不同碳源的调控利用机制,实现外源蛋白在细菌达到饱和生长期后的半乳糖启动子的自动诱发。

产品特点:
1.本产品自动诱导表达,不需要添加任何IPTG或相关诱导物,节约成本。
2.免去了密切监控菌液密度的过程,节约人力物力,尤其适合大规模筛选。
3.可将细菌的生长密度OD600从2左右提高20以上,增加产量。
4.可极大提高外源蛋白的表达量,最高可占细菌总蛋白的45%,增加得率。
5.与各种细胞培养容器(如培养瓶、培养罐、深孔管、发酵罐等)兼容。
6.适用于T7 RNA聚合酶基因由lac启动子控制的任何细菌表达系统,如pET系列。
7.不适用于lacZ或 lacY突变的宿主菌。
8.本产品即开即用,非常方便。

产品组成:
组分规格
半乳糖自诱导培养基成份A200mL
半乳糖自诱导培养基成份B0.25mL

保存条件:常温,有效期两年。

自备试剂:蒸馏水

使用方法:

一、培养基的配制
1.配制半乳糖自诱导培养基工作也:将0.25 mL半乳糖自诱导培养基成份B加入到200 mL的半乳糖自诱导培养基成份A中即得半乳糖自诱导培养工作液。注意:必须严格无菌操作,否则营养丰富的自诱导培养基非常容易第二次污染。
2.贴好标签待用。如果长期时间不用,可以冻存在-20℃。

二、培养基的使用
3.将构建好的质粒转化入细菌,如BL21(DE3),涂于自备的、含有1%葡萄糖的LB培养基中(需要加入适当浓度的抗菌素),37℃培养过夜。
4.挑取单个细菌接种到自备的、含适当浓度抗菌素的液体LB培养基中,37℃培养直到菌液浑浊但不饱和(一般需要6-8小时)。

5.将所得菌液按千分之一的体积比例加入到半乳糖自诱导培养基工作液中(如果自诱导培养基体积是100 mL,则加入100μL菌液),同时加入适当的抗菌素。注意:在自诱导培养基中,如果使用卡拉霉素,其终浓度比一般的培养基高,需要100μg/mL。由于本方法所得菌液密度大,故需要大量氧气,因此培养基的体积不能超过三角瓶的五分之一。三角瓶底最好是皱褶式的,这样摇晃中氧气供应更充分。
6.37℃培养过夜。
7.收集菌液并按常规操作进行蛋白纯化。
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