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产品目录

酵母核蛋白提取试剂盒图片
产品货号:
HR0133
中文名称:
酵母核蛋白提取试剂盒
英文名称:
Yeast nucleoprotein Extraction Kit
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
我司酵母核蛋白提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种酵母中提取核蛋白。提取过程简单方便。制备的核蛋白纯度高,保持天然活性,绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

储存条件:蛋白提取液2-8℃保存;蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期:一年。

注意事项:
●本试剂盒仅供科学研究使用。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点:
1.使用方便,提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
2.将蛋白提取的时间缩短至1小时-2小时。
3.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
4.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
5.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性。

试剂盒以外自备试剂和仪器:
● PBS、移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋振荡器、脱色摇床 ●冰箱,冰盒

使用方法:

使用注意事项:
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
酵母核蛋白提取
1.提取液制备:每200μl蛋白提取液D中分别加入2μl蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2.酵母培养物,在4℃,5000rpm条件下离心5-10分钟,小心汲取培养基,尽可能吸干,收集酵母沉淀。
3.用PBS 洗涤酵母两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4.每100μl体积酵母①沉淀物中加入400μl酵母核蛋白提取液A,混匀后,在30℃条件下保温15分钟。
5.5000rpm条件下离心5-10分钟,收集酵母沉淀。
6.用300μl酵母洗涤液洗涤酵母一次,离心收集菌体。
7.酵母沉淀物中加入500μl酵母蛋白提取液B,混匀后,在室温条件下轻微振荡45-60分钟。
8.5000rpm条件下离心5-10分钟,收集沉淀。
9.沉淀用300μl酵母洗涤液洗涤两次。离心收集沉淀。
10.沉淀中加入400μl冷的酵母核提取液C,高速涡旋15秒,振荡器振荡10分钟。
11.再次高速涡旋振荡5秒,然后在4℃,12000×g条件下离心5分钟,弃上清。
12.在沉淀中加入200μl冷的核蛋白提取液D,高速涡旋振荡15秒。
13.置振荡器上振荡30-40分钟。
14.在4℃,16000×g条件下离心10分钟。
15.快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到酵母核蛋白。
16.将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
注:
① 酵母数量根据实验情况调整,每次的裂解液用量并不是一定的,请根据实际情况调整。
② 建议用BCA 法进行蛋白定量。
③蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。
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