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产品目录

高尔基体提取试剂盒图片
产品货号:
HR0247
中文名称:
高尔基体提取试剂盒
英文名称:
Golgi body extraction kit
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
高尔基体(Golgi apparatus,Golgi bodies)是由许多扁平的囊泡构成的以分泌为主要功能的细胞器。又称高尔基器或高尔基复合体;高尔基体是由数个扁平囊泡堆在一起形成的高度有极性的细胞器。常分布于内质网与细胞膜之间,呈弓形或半球形,凸出的一面对着内质网称为形成面(forming face)或顺面(cis face)。凹进的一面对着质膜称为成熟面(mature face)或反面(trans face)。顺面和反面都有一些或大或小的运输小泡,在具有极性的细胞中,高尔基体常大量分布于分泌端的细胞质中。因其看上极像滑面内质网,因此有科学家认为它是由滑面内质网进化而来的。
高尔基体中的酶主要有糖基转移酶、磺基-糖基转移酶、氧化还原酶、磷酸酶、蛋白激酶、甘露糖苷酶、转移酶和磷脂酶等不同的类型。高尔基体的主要功能将内质网合成的蛋白质进行加工、对比分类、与包装,然后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。
本试剂盒可用于各种动物细胞和实体软、硬组织样本的高尔基体提取。提取得到的高尔基体具有完整生物活性,可以用于高尔基体功能研究、蛋白提取等各种下游应用。
除了高尔基体提取试剂盒,我企业还有细胞核提取、线粒体提取等各种亚细胞结构的提取试剂盒以及相关的蛋白质提取试剂盒。
咱们可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、液体、土壤等不同样本的蛋白提取试剂盒,包含用于非双向电泳和双向电泳等不同下游应用的试剂盒以及含去垢剂成分和不含去垢剂成分的蛋白提取试剂盒,专用于蛋白质谱检测的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒可供选择。还可提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体等不同细胞器的提取试剂盒。

储存条件:2-8℃保存。
有效期:一年。
使用前请仔细阅读产品说明书
使用限制:本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
产品更新:我司会更新或升级产品,以优化和增强其使用性能,产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时,请参照随产品附带的说明书,不要参照网上下载的说明书,可能是不同的版本。
使用安全: 使用时需要合适的实验室外套,一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如
果试剂不小心接触皮肤或眼睛,应马上用水冲洗。

注意事项:
1.正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得最佳实验结果。
2.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3.禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4.样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5.最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6.实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋混匀器、振荡器、Dounce匀浆器 ●冰箱,冰盒 PBS
使用注意事项:
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
● 最好使用Dounce匀浆器匀浆,如果没有Dounce匀浆器,用玻璃匀浆器匀浆也可,但是高尔基体回收率会下降。

使用方法:
细胞高尔基体提取:
1.取1-2×107个细胞,在4℃,500×g条件下离心2-3分钟,小心汲取培养基,尽可能吸干,收集细胞;
【注】
● 贴壁培养细胞用胰酶消化下来或者用刮刀刮取均可。
2.用冷PBS 洗涤两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
3.加入500μl冷的试剂A,置冰上10分钟。
4.用Dounce匀浆器充分匀浆几分钟,然后在4℃,1000g 力条件下离心5分钟。
5.弃沉淀,将上清吸入另一预冷的干净离心管。
6.在4℃,3000g 力条件下离心10分钟。
7.弃沉淀,将上清吸入另一预冷的干净离心管。
8.在4℃,5000g力条件下离心10分钟。
9.弃上清,将上清吸入另一预冷的干净离心管。
10.在上清中加入10μl试剂WT,在4℃,20000g力条件下离心20分钟。
11.弃上清,留沉淀。
12.在沉淀中加入500μl冷的试剂B,混匀。
13.在4℃,20000g力条件下离心30分钟。
14.弃上清,沉淀用高尔基体保存液重悬。
【注】
● 也可以不用试剂D,直接根据下游应用需要用合适的缓冲液重悬保存或直接用于下游实验。
15.即得到高尔基体样品,置冰箱备用或直接用于下游实验。
组织高尔基体提取:
1.取50-100mg 新鲜动物组织样本,用PBS洗涤干净。
2.用剪刀尽可能剪碎,用冷PBS 洗涤两次。
3.加入500μl冷的试剂A,置冰上10分钟。
4.用Dounce匀浆器充分匀浆几分钟,然后在4℃,1000g 力条件下离心5分钟。
5.弃沉淀,将上清吸入另一预冷的干净离心管。
6.在4℃,3000g 力条件下离心10分钟。
7.弃沉淀,将上清吸入另一预冷的干净离心管。
8.在4℃,5000g力条件下离心10分钟。
9.弃上清,将上清吸入另一预冷的干净离心管。
10.在上清中加入10μl试剂WT,在4℃,20000g力条件下离心20分钟。
11.弃上清,留沉淀。
12.在沉淀中加入500μl冷的试剂B,混匀。
13.在4℃,20000g力条件下离心30分钟。
14.弃上清,沉淀用高尔基体保存液重悬。
【注】
● 也可以不用试剂D,直接根据下游应用需要用合适的缓冲液重悬保存或直接用于下游实验。
15.即得到高尔基体样品,置冰箱备用或直接用于下游实验。
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