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产品目录

植物种子蛋白提取试剂盒(2D电泳用)(高淀粉含量样本用)图片
产品货号:
HR8041
中文名称:
植物种子蛋白提取试剂盒(2D电泳用)(高淀粉含量样本用)
英文名称:
Plant seed protein extraction kit (2D electrophoresis) (high starch content sample)
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
植物种子蛋白提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种高淀粉含量的植物种子样品中提取可溶性蛋白。如水稻、荞麦、玉米、小麦等。提取过程简单方便。
本试剂盒提取的蛋白样本不含有高浓度的盐成分,可直接用于等电聚焦、双向电泳,如下游实验需要直接用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验,请使用我企业其他货号的试剂盒。

储存条件:提取液A 2-8℃保存;提取液BCDE室温保存。
效期:一年。

※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制:本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
产品更新:我企业会更新或升级产品,以优化和增强其使用性能,产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时,请参照随产品附带的说明书,不要参照网上下载的说明书,可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全:使用时需要合适的实验室外套,一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛,应马上用水冲洗。

注意事项:
1.正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得最佳实验效果。
2.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3.禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4.样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5.最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6.实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

试剂盒以外自备试剂和仪器:
● PBS缓冲液● 移液器、吸头 ● 2ml、5ml离心管 ●离心机及离心管 ● 涡旋振荡器
● 振荡器/脱色摇床 ●冰箱,冰盒

使用方法:

使用注意事项:
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

1.将适量待提取种子样本剥皮,用PBS或纯水洗涤3次。
2.将样本置研钵液氮充分研磨。
【注】:
● 没有液氮研磨条件也可直接用提取液A 研磨。
3.加入500μl蛋白提取液A充分混匀。移入离心管。
4.将离心管置振荡器轻轻振荡30分钟-60分钟。
5.在4℃,15000g离心20分钟。
6.收集上清,弃沉淀。
7.取5ml离心管,加入500μl离心上清,再加入2ml试剂B,500μl试剂C,1.5ml试剂D,涡旋20秒充分混匀。
8.冰浴或4℃冰箱静置30分钟以上。
9.在4℃,11000g条件下离心15分钟。
10.小心移除上层清液丢弃,收集中下层含蛋白层。
11.在4℃,15000g以上条件下离心20分钟。
12.弃上清,收集沉淀。
13.用50-200μl试剂E充分溶解蛋白沉淀。
【注】:
● 也可直接用等电聚焦用水化上样缓冲液过夜溶解蛋白沉淀。
14.在4℃,12000g条件下离心20分钟。
15.收集上清用于下游实验。
【注】:
● 建议用BCA 法进行蛋白定量。相关产品:HR0329。
●蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。
常见问题分析:
●蛋白浓度低?
部分植物种子蛋白丰度极低,在条件允许的情况下,需要尽可能加大种子样本的上样量。
处理部分样本时可能没有裂解完全,导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理,没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
●用什么方法定量蛋白?
建议用BCA 法。不适合用Bradford 法,因为试剂E中含有干扰Bradford 法的组份,导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系,则可以用Bradford 法定量。
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