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产品目录

酵母蛋白提取试剂盒(无去垢剂)图片
产品货号:
HR8066
中文名称:
酵母蛋白提取试剂盒(无去垢剂)
英文名称:
Yeast protein extraction kit (no descaling agent)
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
酵母蛋白提取试剂盒适用于从各种酵母样本中高效而温和地抽提可溶性总蛋白。提取过程简单方便,避免了重复性差的研磨法,超声波法或压榨法对酵母细胞的破坏,避免激烈的机械处理造成的氧化和热度升高对目的蛋白的破坏作用。
本试剂盒的所有组份均不含去垢剂成分,最后得到的蛋白样品的成分对NI 柱纯化、分子筛、离子交换、亲和纯化等下游应用没有去垢剂影响。
本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解膜组份,包括细胞质膜、核膜和各种细胞器膜。
本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分,不可直接用于2D电泳,如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳,请使用我企业其他货号的试剂盒。也可以将最后样品除盐后再用于2D电泳,用脱盐柱脱盐处理(相关产品HR0389)。
我企业可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、液体、土壤等不同样本的蛋白提取试剂盒,包含用于非双向电泳和双向电泳等不同下游应用的试剂盒以及含去垢剂成分和不含去垢剂成分的蛋白提取试剂盒,总计300 多种蛋白提取试剂盒可供选择。我企业还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体等不同细胞器的提取试剂盒。

储存条件:蛋白提取液2-8℃保存;蛋白酶抑制剂-20℃保存。
【注】:蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
有效期:一年。

※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制:本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
产品更新:我企业会更新或升级产品,以优化和增强其使用性能,产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时,请参照随产品附带的说明书,不要参照网上下载的说明书,可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全:使用时需要合适的实验室外套,一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛,应马上用水冲洗。

注意事项:
1.正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得最佳实验效果。
2.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3.禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4.样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5.最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6.实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

产品特点:
1.蛋白得率远高于玻璃珠法。
2.使用方便,从酵母中提取蛋白不需经过研磨、超声破碎等前处理。
3.将蛋白提取的时间缩短至1小时。
4.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
5.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
6.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含5种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
7.本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材:
仪器
●离心机● 振荡器● 涡旋混匀器● 移液器●冰箱●冰盒
耗材
●离心管● 吸头
试剂
● PBS

使用方法:

使用注意事项:
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
●本试剂盒中提取液和蛋白酶抑制剂中均不含EDTA,根据需要可自行加入。

1.提取液制备:
每500μl酵母蛋白提取液B中加入2μl蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
【注】:
● 根据需要处理的样品数量准备蛋白提取液,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
● 加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未使用完,再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制剂。
2.取酵母培养物,在4℃,2500g条件下离心5-10分钟,小心汲取培养基,尽可能吸干,收集酵母沉淀。
3.用冷PBS 洗涤酵母两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4.每100-200μl体积酵母沉淀物中加入300-500μl冷的酵母蛋白提取液A,混匀后,在室温或37℃条件下于摇床振荡1-2小时。
【注】:
● 若后面步骤中试剂B 处理时沉淀难以裂解,应延长此步试剂A的处理时间。
5.在4℃,2000g条件下离心5-10分钟,移除上清,收集沉淀。
6.在沉淀物中加入300-500μl冷的酵母蛋白提取液B,混匀后,在2-8℃条件下振荡30-45分钟。
【注】:
●试剂B 处理后沉淀应明显减少,否则延长处理时间。
●用振荡器/摇床的较低转速保持提取液晃动即可。
● 没有振荡器的话,在4℃静置,稍微延长处理时间,中间每隔几分钟用移液器吹打混匀。
7.在4℃,12000g条件下离心15分钟。
8.将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到酵母总蛋白。
9.将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
【注】:
● 建议用BCA法进行蛋白定量。相关产品:HR0329。
●蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。
常见问题分析:
●蛋白浓度低?
处理部分样本时可能没有裂解完全,导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A和B的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理,没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
●用什么方法定量蛋白?
建议用BCA法。不适合用Bradford法,因为试剂A中含有干扰Bradford法的组份,导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系,则可以用Bradford法定量。
● 提取的蛋白具有活性吗?
本试剂盒不含有离子型去垢剂组份,不破坏蛋白的结构,没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏,蛋白均保持其天然构象和活性。
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