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产品目录

BCA蛋白定量试剂盒图片
产品货号:
WH0180
中文名称:
BCA蛋白定量试剂盒
英文名称:
BCA Protein Assay Kit
产品规格:
50次微管检测/500次微板检测|250次微管检测/2500次微板检测
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒是根据BCA法研制而成,实现了对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。本试剂盒的原理是蛋白质分子中的肽键结构在碱性环境下能与Cu2+络合生成络合物,将Cu2+还原成Cu+,而BCA试剂可敏感特异地与Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物,并在562nm处有最大光吸取值,该复合物颜色深浅与蛋白质浓度成正比,可根据吸取值的大小来测定蛋白质的含量。1小时内即可完成蛋白质定量检测。本试剂盒含有牛血清白蛋白(BSA)溶液作为蛋白质标准溶液,测定范围为20~2000μg/ml。本试剂盒适用于测定含有较高浓度去垢剂蛋白溶液中的蛋白浓度。

产品特点:
·便捷快速:与Lowry法相比,该方法可在1小时内完成蛋白质定量检测,工作液配制后24h内使用无影响。
·灵敏准确:测定范围是20~2000μg/ml(562nm读数)。在测定范围内有良好的线性关系,变异系数小。
·兼容性好:与Bradford法相比,对去垢剂耐受能力大为提高,在Tween20低于4%,NP40低于5.0%,SDS低于4%,Triton X-100低于4%的浓度范围内,即可获得准确定量结果(其余物质耐受度详见说明书)。使用微板法测定时将体积按比例减小。

产品组成:
组分WH0180-1WH0180-2
BCA试剂A100ml500ml
BCA试剂B3ml15ml
BSA标准品(2mg/ml)2×1ml10×1ml

WH0180-1试剂盒所携带的试剂可满足50 rxn微管检测和500 rxn微板检测。
WH0180-2试剂盒所携带的试剂可满足250 rxn微管检测和2500 rxn微板检测。
保存条件:BCA试剂A和BCA试剂B室温保存,BSA标准品-20℃保存。

操作步骤:
1.标准品的稀释:用与样品相同缓冲体系的稀释剂按下表对BSA标准品进行稀释:
管号稀释剂BSA(来源)BSA终浓度(μg/ml)
A0μl300μl(母液)2000
B125μl375μl(母液)1500
C325μl325μl(母液)1000
D175μl175μl(B管)750
E325μl325μl(C管)500
F325μl325μl(E管)250
G325μl325μl(F管)125
H400μl100μl(G管)25
I400μl00(空白对照)

2.配制BCA工作液:依据样品数量,将试剂A和试剂B按体积比50:1配制适量BCA工作液,并充分混匀。
??注:配制BCA工作液前请将试剂A摇晃混匀
3.标准比色杯测定方法:
①汲取0.1ml的每种标准品和待测样品置于合适的管中。
②加入2.0 ml的BCA工作液,彻底混匀。
③加盖,37℃孵育30min后冷却至室温或室温放置2h。
④用紫外分光光度计于562nm处检测其吸光度。
⑤根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
4.微管测定方法:
①分别取25μl表格中新鲜配制的BSA标准液和待测样品,加入到96孔板中。
②每孔中加入200 μl BCA工作液,并充分混匀。
③加盖,37℃孵育30min后冷却至室温或室温放置2h。
④用紫外分光光度计于562nm处检测其吸光度。
⑤根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。

注意事项:
1.测值范围:OD540-OD590,分别测定OD540,OD562以及OD590的吸取值,标准曲线均为线性,OD562测值最高。
2.标准曲线的线性范围为20-2000μg/ml。
3.工作液配制之后24 h内使用对标准曲线无影响。

适用范围:
本检测方法可耐受的干扰物质浓度表:
类别干扰物质耐受浓度
盐/缓冲液HEPES(pH7.9)100mM
PIPES(pH6.8)100mM
HCl100mM
NaOH100mM
Sodium citrate100mM
NaCl1M
TRICINE(pH8.0)20mM
Sodium Acetate200mM
Guanidine.HCl4M
Tris50mM
螯合剂EDTA10mM
还原剂DTT0.2mM
去垢剂NP405%
TRITON X-1004%
SDS4%
TWEEN204%
混合物&
极性化合物
PMSF1mM
Acetone10%
Ethanol10%
Glycerol10%
Urea3M
DMSO10%
Sucrose40%
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