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产品目录

Bradford蛋白定量试剂盒图片
产品货号:
WH0181
中文名称:
Bradford蛋白定量试剂盒
英文名称:
Bradford Protein Assay Kit
产品规格:
50次微管检测/500次微板检测
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒是根据考马斯亮蓝G-250(Coomassie Brilliant Blue G)法研制而成,实现了蛋白浓度测定的快速,稳定和高灵敏度,其原理是考马斯亮蓝G-250可以在酸性条件下和蛋白质结合产生特殊的蓝色,最大吸取波长在595nm处。染色反应可在5-10分钟内完成,颜色能保持30分钟稳定,因此可通过比色分析在几分钟内快速测定蛋白质含量。本试剂盒含有配制好的考马斯亮蓝溶液和牛血清白蛋白(BSA)溶液作为蛋白质标准溶液,测定范围为50-1000μg/ml。

产品特点:
·快速方便:即开即用,操作简便。
·灵敏准确:测定范围是50-1000μg/ml(595nm读数),可检测25 μg/ml的蛋白质,在测定范围内有较好的线性关系,变异系数小。
·兼容性广:与其它蛋白浓度测定方法(如Lowry法)相比,该方法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中的DTT浓度可高达5mM,但受略高浓度的去垢剂影响,需确保SDS低于0.1%,Triton X-100低于0.1%,Tween-20,60和80低于0.06%,使用微板法测定时将体积按比例减小。

使用举例:
Bradford蛋白定量试剂盒使用举例

产品组成:
组分规格
考马斯亮蓝染液300ml
BSA标准溶液(1mg/ml)10×1ml

保存条件:考马斯亮蓝染液4℃避光保存。牛血清白蛋白(BSA)溶液-20℃保存。

注意事项:
1.考马斯亮蓝染液与石英比色皿可以产生强烈的结合,因此建议使用玻璃或塑料比色皿。
2.疏水的膜或“粘”蛋白在考马斯亮蓝染液存在下可以形成沉淀,可以使用少量的NaOH促进蛋白的溶解。(在这种情况下向样品中加入等体积的1M NaOH)
3.由于不同蛋白与考马斯亮蓝染液的结合程度不同,因此使用被测蛋白做标准曲线,可以得到更准确的结果。
4.应按蛋白浓度由低到高的顺序进行测定,测定过程请连续进行,不要清洗比色皿,因为水质会影响测定结果。

操作步骤:
1.考马斯亮蓝染液在使用前应平衡温度至室温并温和颠倒混匀,预热分光光度计;
2.将0、10、20、30、40、50、60μl牛血清白蛋白(BSA)标准溶液(1mg/ml)分别加入到试管中,加入PBS补足到150 μl;
3.将适当体积的样品加入到试管中,并用PBS补足到150 μl;
4.向各试管中加入2.85ml考马斯亮蓝染液,混匀,室温放置5-10min;
5.用分光光度计测定595nm处的吸光值,并记录读数;以不含BSA的样品的光吸取值作为空白对照。
6.绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内,请稀释样品后重新测定。
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