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产品目录

HRP化学发光检测试剂图片
产品货号:
WH0183
中文名称:
HRP化学发光检测试剂
英文名称:
HRP Chemiluminescent Kit
产品规格:
25ml×2|50ml×2
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品是基于Luminol的新一代增强型化学发光底物试剂,它由辣根过氧化物酶(HRP)催化发生化学反应,发出荧光,结果可以通过X光片压片和其他显影技术展现或使用Luminometer检测。溶液A主要成分为Luminol及特制发光增强剂。溶液B主要成分为H2O2及特制稳定剂。广泛应用于Western、Far-Western Blot、ELISA、Southern Blot、Northern Blot、Dot Blot等实验。

产品特点:
·灵敏度高:可检测pico级抗原。
·高信噪比,背景干净。发光迅速,持续时间达6小时以上。
·可检测低丰度蛋白,节省抗体(一抗1:2000-1:5000;二抗1:4000-1:10000)。

产品组成:
组分WH0183-1WH0183-2
试剂A25ml25ml×2
试剂B25ml25ml×2

保存条件:A液和B液2-8℃避光分别保存,保质期一年。

客户自备:
1.漂洗缓冲液:PBS中含0.05-0.1%的Tween-20。
2.封闭液:我企业推出的PA106或其他封闭液。
3.用封闭液或PBS稀释一抗,每个抗体的最佳稀释度根据实验来决定。
4.用封闭液或PBS稀释HRP标记的二抗,每个二抗的最佳稀释度根据实验来决定。
5.暗室、暗盒、X光片等曝光设备。

操作步骤:
1.封闭:将膜与封闭液室温振荡孵育60min,或4℃过夜。
2.将膜与用封闭液稀释的一抗室温振荡孵育1-2h或4℃过夜。
3.用漂洗缓冲液洗膜2-3次,每次5 min。
??注意:增加漂洗次数、加大漂洗缓冲液量将有助于降低背景。
4.将膜与用封闭液稀释的HRP标记的二抗室温振荡孵育1 h。
5.用漂洗缓冲液洗膜2-3次,每次5 min以除去未结合的HRP标记的二抗。
??注意:膜和二抗孵育后必须充分洗涤,以除去膜上未结合的HRP标记的二抗。
6.将底物试剂A和试剂B等体积混合制备底物工作液,底物工作液应现用现配。
??注意:底物试剂从4℃拿出后应平衡至室温,经实验证明反应温度是10-50℃,最佳反应温度是20-37℃。每cm2膜约需0.125ml的底物工作液,为了取得最佳效果,建议使用新鲜配制的底物工作液。
7.洗涤好的膜摆放到保鲜膜上,将底物工作液加到膜上后应马上用保鲜膜包好,迅速放入暗盒中进行曝光。
8.暗室中小心地将X光片压到膜上,先初始曝光1 min,观察结果。改变曝光时间以取得最佳效果。
??注意:发光反应的前5-30 min光信号最强,一般能持续数小时,但随着时间延长,光信号降低。若抗原含量低、信号弱,可以适当延长曝光时间。
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