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产品目录

藻类RNA柱式提取试剂盒图片
产品货号:
BTN120503
中文名称:
藻类RNA柱式提取试剂盒
英文名称:
Algae RNA Column extraction kit
产品规格:
50次
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒是专门用于各种藻类样品RNA提取的产品。

试剂盒特点:
1. 操作简单快捷,整个过程只需要约30分钟。
2. RNA纯度高,OD260/280一般都在2.0左右,可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA合成等。
3. RNA产量高,一般在20-70μg/mL液体藻类培养物(约2.0 ×107个细胞)。
4. 非酶细胞破裂法,适用于各种形态的藻类和各个种属的藻类。

试剂盒组成:
成分规格
溶液A50ml
溶液B50ml
溶液C100ml
溶液D30ml
离心吸附柱50套
通用洗柱液100ml
RNA洗脱液10ml
说明书1份


储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。

使用方法:
1. 将1-5mL液体藻类培养物在1.5mL塑料离心管中5000-7,000rpm 4℃离心 1分钟,并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入0.5mL溶液A并充分吹打混匀。注意:溶液A存放时容易产生沉淀,如果有沉淀,用前请置于65℃融化并充分摇晃均匀。
3. 加入0.5mL溶液B,剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。注意:不要超过5分钟,否则RNA容易降解。
5. 5000-7,000rpm 4℃离心3~5分钟,转移上清到一自备的、干净的1.5mL塑料离心管中。
6.在上清液中加入0.2mL自备的氯仿,充分振荡30秒混匀。
7. 4℃ 5000-7,000rpm离心3~5分钟,转移上清液到一自备的、干净的5-10mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清液(约1mL左右)3倍体积的溶液C和1倍体积的溶液D,充分混匀。如果上清为1mL,则加入3mL溶液C和1mL溶液D。
9. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中,每次转移0.7mL混合液到离心吸附柱中,室温放置2-3分钟以让RNA跟吸附膜充分结合,然后5000-7,000rpm室温离心30-60秒,弃收集管中的穿透液,然后再加入0.7mL混合液,重复上面的操作,直到混合液全部挂柱。
10. 第一次洗涤:将0.7mL通用洗柱液加到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
11. 第二次洗涤:一次洗涤一般足够去除杂质,但如果样品OD260/280比值不高,可以再用0.3mL通用洗柱液重复上步洗涤一次。
12.室温离心空柱子(带收集管)半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 1.5mL塑料离心管中,加入30-100μL RNA洗脱液。具体加多少根据RNA浓度决定,建议先使用小体积洗脱液,这样浓度过高还可以稀释。
14.室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以马上使用或存放于-80℃待用。
15. RNA完整性的电泳检测:
?注意:普通DNA上样液不含变性剂,更没经过去RNase处理,所以最好不要用于RNA电泳。
16. RNA产量和纯度产率测定:
?将5-10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸取。通过光吸取可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA稀释在DEPC水中检测OD260和OD280,否则光吸取比在TE(pH7.5-8.2之间)中测得的低10%-15%;也不要稀释过度,使OD读数在仪器的有效范围之外,这样得到的OD比值没有意义。
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