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产品目录

葡聚糖凝胶G-50图片
产品货号:
QN4104
中文名称:
葡聚糖凝胶G-50
英文名称:
Sephadex G-50 medium
产品规格:
25g|100g|500g
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
葡聚糖凝胶G-50利用分子筛作用,进行多肽分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定。球蛋白分离范围1500~30000

葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶,含有大量的羟基,很容易在水中和电解质溶液中溶胀。G型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度,因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。

葡聚糖凝胶有不同的粒度。超细级的葡聚糖凝胶是用于需要极高分辨率的柱色谱和薄层色谱。粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程,可在较低的压力下获得较高的流速。另外,粗级也可用于批量工艺。

葡聚糖凝胶不溶于一切溶剂(除非它被化学降解)。它在水、盐溶液、有机溶剂、碱和弱酸性溶液中都是稳定的,在强酸中凝胶骨架的糖昔键被水解。长期接触氧化剂将破坏凝胶,因而应避免使用。

葡聚糖疑胶并不熔融,可以在湿态、中性PH进行灭菌或在高压灭菌器120℃、30分钟而不影响它的色谱性质。干态的凝胶加热至120℃以上将开始焦糖化。葡聚糖凝胶的机械强度取决于交联度。

技术参数:
性? ?状:白色微球,多孔
凝胶类型:凝胶过滤填料,亲水型凝胶
结构成分:交联右旋糖酐
球蛋白分离范围:1500~30000
粒? ?径:细颗粒20~80?m,中颗粒50~150?m,粗颗粒100~300?m
工作pH值:pH2~10
操作温度:4~40℃
保存条件:4~25℃

使用方法:
1.葡聚糖凝胶预处理:
在室温下,将葡聚糖凝胶干粉浸泡于蒸馏水中至少24小时,并不断搅拌以保证凝胶溶胀,或者用蒸馏水煮沸至少1小时直至充分溶胀,凝胶体积不再变化。
注:在溶胀前,加入蒸馏水搅拌后使其自然沉降,沉降后若上层溶液中漂浮的凝胶碎片颗粒较多,需要重复多次漂洗将其除去,防止层析时阻塞凝胶柱,影响流速。
2.装柱:
将溶胀好的凝胶根据装柱要求一次性置入柱内,注意保持湿态装柱,并避免柱内产生气泡或断层;?装柱要均匀,可在凝胶耐受的操作压下装柱,装好的凝胶柱可以检测柱效,检测过滤柱装填是否合格。
凝胶层析分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度:分级分离时,一般需要100cm左右长的层析柱,柱高与直径之比为20~100:1,柱高过高时,凝胶挤压变形阻塞会引起较大的反压,应当尽可能避免;分组分离(例如脱盐)时用短柱,柱高控制在40~50cm以下,柱高与直径的比约为5~10:1。
3.平衡:
上样前用平衡液平衡层析柱至少3~5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(例如流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);
4.上样:
分级分离时上样量一般为5%的柱床体积,咱们建议初次上样控制在1-2%的床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积。
样品溶液如有杂质或沉淀应过滤或离心除去,样品的粘度不能过高,否则影响分离效果。
5.洗脱方法:
可以用无盐水,也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱缓冲液中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离纯化;
6.在位清洗(CIP)
凝胶使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向清洗四个柱体积,再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。
7.保存
凝胶柱暂时不用,可将其回收,一般方法是将凝胶用水冲洗干净滤干,可加入0.02%叠氮化钠防腐或用20%乙醇浸泡,以控制微生物生长。
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